1 范围QKU

本技术规程规定了牛冷冻精液人工授精配站所具备的必要设备、发情鉴定、冷冻精液、解冻、输精和妊娠检查技术的一般原则，适用于牛冷配站的冷冻精液人工授精及相关技术人员。2 定义2.1 发情 母牛发育到一定年龄，表现出周期性性生理活动。2.2 产后发情 母牛产犊后第一次发情。2.3 发情周期 母牛性成熟后，每隔一定时间发情一次，这种有规律的性生理活动周期为发情周期。3 必要设备 冷配站应具备以下必要设备：3.1贮精设备：10立升和30立升液氮罐各1个，冰箱1台。3.2输精设备：输精架、输精枪（管）、解冻缸（杯）、乳胶手套、围裙、胶靴等各1台或若干。3.3精液检查器具：普通显微镜、载玻片、盖玻片、血球计数器、记数计等各1台或若干。3.4消毒设备：干燥箱、消毒锅、电炉、酒精灯各1台或若干。3.5玻璃器皿：注射器、试管、滴管、漏斗、玻璃瓶、玻璃棒、烧杯等各若干。 3.6药品及化学试剂：消毒用酒精、来苏尔、治疗不孕的药品、冲洗子宫的药品、配制颗粒冻精解冻液用的试剂等个若干。3.7其它用品：纱布、棉花、天平、药品橱、洗涤架、污物桶、长柄镊子、瓶刷、搪瓷盘、滤纸、毛巾、肥皂、卫生纸等各若干。4 发情鉴定4.1 发情期 母牛常年发情，发情周期18天--24天，发情持续期20小时--36小时，产后第一次发情10天--40天。 4.2 发情表现 4.2.1 发情初期。 母牛鸣叫不安，食欲开始减退，想爬跨它牛，但拒绝公牛爬跨，外阴轻微红肿，阴道粘膜充血，流出稀薄透明液体。直肠检查子宫变软，卵巢有一侧增大，在卵巢上有卵泡，无弹性。此期维持10小时左右，不能输精。 4.2.2 发情中期。母牛极度不安，食欲停止，性欲旺盛，求配心切，爬跨它牛，外阴部明显肿胀，流出粘液增多。直肠检查子宫松软，卵泡体积增大，直径1.0㎝--1.5㎝，突出于卵巢表面，弹性强，有波动感。此期约维持8小时--12小时，输精偏早。 4.2.3 发情末期。 母牛性欲减退，不再爬跨它牛，由不安转为安静，外阴部肿胀减退，粘液变稠，呈黄白色。直肠检查子宫颈变松软，卵泡壁变薄，波动很明显，呈熟葡萄状，有一触即破感觉。此期约维持8小时--10小时，为最佳输精时期。 4.3 鉴定方法 发情鉴定采用外部观察和直肠触摸卵泡相结合，以直肠检查卵泡发良程度为主要依据。直肠触摸子宫、卵巢，判断其长短、粗细、质地。顺序是：手戴乳胶手套，涂以滑润剂，五指并拢伸入肛门，清除宿粪后，手掌伸平，掌心向下，在骨盆底的正中有一长而稍扁的棒状物为子宫颈。顺着子宫颈向前伸进，可摸到子宫角间沟，沟的两旁各有一条向前弯曲的圆筒状物，是左右子宫角，沿着子宫角大弯向下侧面摸，可摸到扁圆、柔软而有弹性的卵巢。用手指触摸卵巢表面的卵泡发育程度，以确定是否输精。5 精液解冻 5.1 细管冻精 用长柄镊子从贮藏罐中取出细管后，直接放入38℃--40℃温水中解冻，全部融化后取出，擦干水，用专用剪刀剪开不带棉塞的一端，把有棉塞一端装在输精推杆上，套上外保护套备用。 5.2 解冻液的制备 解冻液制备执行GB/T4143。5.3 颗粒冻精解冻 取试管一支，加1ml解冻液，放入40℃温水中预热，取出一粒颗冻精投入试管中，不断摇动至接近融化时取出，镜检合格后吸入输精管中备用。6 输精 6.1 输精方法采用直肠把握输精法。输精前应先将待配母牛保定于配种架中，用温肥皂水将阴门附近的粪便、污物冲洗干净，然后用温水冲洗，用卫生纸擦干。输精员将手指甲剪短磨光，手臂套上乳胶手套，涂上一层润滑剂，五指并拢成锥形，插入直肠，排出粪便。隔着直肠壁握住子宫颈管。左手臂稍微下压，使阴门开张。右手持输精管（枪），由阴门缓缓插入，开始先稍向上斜插，避开尿道口，然后再向下平插至子宫颈口，将输精管前端深入子宫颈口内3㎝~4㎝（约2--3个皱壁），将输精管（枪）稍微后拉即可输精，输精后缓慢拔出输精管（枪）。 6.2 注意事项6.2.1 冻精在38℃~40℃温度下进行镜检，镜检活力0.3以下者不予输精。 6.2.2 直肠检查或输精，母牛努责、肠道形成空洞时，不要硬性抓捏。 6.2.3 冬季输精要防止低温对解冻后精液的冷打击。 6.2.4 输精器严格消毒，每头牛每次用一支，不能重复使用，防止污染。 6.2.5 解冻后要立即输精，精液存放不应超过1小时。 6.2.6 输清后要记录配种情况（包括公牛品种、公牛号、母牛号、冻精活力、输精时间、母牛发情状况等）。7 妊娠检查 7.1 方法 采用直肠检查法。不仅能确定是否妊娠，还可大致确定其妊娠时间和胎儿的活动情况，在配种20天--60天 和90天时各检查一次，即可准确判定母牛是否怀孕。直肠检查判断的依据：在怀孕初期，要以卵巢、子宫角的形状、质地的变化为主；当胚胎下沉不易触摸时，以卵巢位置及子宫中动脉的妊娠脉搏为主。 7.2 步骤 先摸到子宫颈，再将中指向前滑动，寻找角间沟，然后将手向前、向下、再向后，分别触摸两个子宫角及卵巢。 7.3 怀孕症状 母牛怀孕后不同时期生殖器官会有不同的变化。