墨西哥蝙蝠中疑似猪腮腺炎样病毒的检测与分离
前言
蝙蝠与许多新出现的传染性疾病有关,它是许多病毒的宿主并且使这些病毒具备了跨种传播以及感染人类、家畜和野生哺乳动物的能力。回顾性分析显示,在美洲大陆存在两种不同的新的副粘病毒,它们从属于腮腺炎病毒属。其中一种是马普埃拉病毒(Mapueravirus),该病毒是1979年在巴西的一只健康狐蝠的唾液腺中分离到的;另外一种是猪腮腺炎病毒(PorPV),它出现于20世纪80年代的墨西哥,是一种新的副粘病毒,并已经确定它能够在猪上引起叫做“蓝眼病”(BED)的疾病。序列和基因组结构比较结果表明PorPV-LPMV与MprPV相近,系统发育研究表明PorPV-LPMV可能来自于一种未知的野生宿主。该研究的目的是确定在自然界中蝙蝠是否是PorPV的宿主。
材料和方法
在两个不同的但同时爆发BED的区域(一个地区在北纬18°42´32.4”,西经99°14´14.1”,1004MASL的海拔;另一个在北纬18°46´14.33”,西经98°51´55.95”,1403MASL的海拔,位于墨西哥的中部地区(莫雷洛斯州))共捕获了20只蝙蝠(4只虫食性的帕氏髯蝠;12只牙买加菓蝠;2只圆头叶蝠;4只小囊翼蝠)。根据环境和自然资源部的许可证FAUT-0211收集捕获蝙蝠。按照动物护理和伦理委员会的伦理指导原则在墨西哥城进行所有的动物研究。通过血清-病毒中和试验及免疫过氧化物酶单层细胞试验检测血清样品。病毒的分离是将冷冻的脑组织样品在MEM培养基混匀到10%(w/v),然后接种到MDCK细胞单层。96h之后观察培养细胞是否出现细胞病变(CPE),并通过免疫荧光试验进行分析。按照说明书,使用TRIzolLS试剂提取细胞总RNA。设计RT-PCR扩增引物来扩增PorPV-HN基因(基因库登录号:S77541)中的一段613bp保守区域,并将其与先前基因库已经公布的PorPV-HN基因序列进行比较。对PCR凝胶产物进行纯化,并使用ABIPrism3100DNA基因测序分析仪进行双向测序。使用ClustalWv.1.8软件进行多重序列比对。
结果
血清学分析表明在8只蝙蝠中存在针对PorPV的中和抗体(抗体效价在1:20至1:1280之间),其中有两只帕氏髯蝠、三只牙买加菓蝠、两只圆头叶蝠和一只小囊翼蝠。通过RT-PCR从15个脑组织样品中扩增HN基因片段,并对其中四个样品使用免疫荧光试验检测感染细胞培养物中的PorPV抗原(两只牙买加菓蝠和两只圆头叶蝠)。PCR产物的序列分析表明:以上所分析的600个核苷酸区域中,从蝙蝠中分离到的所有序列与最初的PorPV-LPMV株有99.7%的氨基酸同源性,与抗原变异株PAC4有100%的同源性,这表明它们属于同一毒株。
结论和分析
在该研究中,我们分离到了如前面所描述的猪腮腺炎样病毒,并且证实了蝙蝠中存在PorPV的RNA片段。这株病毒是从脑和感染细胞培养物中分离得到的。这些发现表明在自然界中蝙蝠能够作为PorPV的宿主。在不同的蝙蝠样品中检测该病毒的抗体将有助于我们进一步了解PorPV的进化、跨种传播机制及在不同动物物种间的发病机制。
猜你喜欢
相关推荐
-
-
-
-
-
-
中国养猪网讯: 前言 非洲猪瘟病毒(ASF)能够引起高死亡率,对经济产生严重影响并且会急速传染周边区域,这使其成为了一种备受关注的病原。由于缺少有效的疫苗,使得预防和控制ASFV变的......
-
母猪全年发情不受季节限制,后备母猪约在150~170日龄发情,断奶后母猪3~10天发情。母猪发情周期为16~25天,平均21天。母猪发情一般可持续3~5天, 发情症状从出现到结束需要60......
-
这段时间有一些养殖朋友询问一些猪厌食的情况,经询问,因为天气转热,这些情况才逐渐增多,毫无疑问,罪魁祸首就是热应激引起的猪食欲下降的问题。 ......
-
1、剪毛时隐匿风、雪、阴、湿天气,决意晴天,工作间的温度在10~1六℃为好。G1W 2、搜查兔舍,贯注贼风冲击,铺较厚的垫干草,干草要细、花、软。门上吊草帘,夜晚拉下,白天吊起晒太阳。......
-
阿拉伯马,听名字就知道它来自阿拉伯并且以阿拉伯来命名。而且阿拉伯马是地球上最古老的马种。阿拉伯马最初被用作战马。这也是历史上马的最主要用途之一。那么有小伙伴就要问了,除了阿拉伯之外的其他......
-
中国养猪网讯: 前言 猪流行性腹泻(PED)是一种由冠状病毒科的猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的一种肠道疾病。PED是一种急性、高度传染性的肠道疾病,临床特征为水样腹泻、呕吐和严重......
版权声明:本文内容由互联网用户自发贡献,该文观点仅代表作者本人。本站仅提供信息存储空间服务,不拥有所有权,不承担相关法律责任。如发现本站有涉嫌抄袭侵权/违法违规的内容, 请发送邮件至990157430@qq.com 举报,一经查实,本站将立刻删除。