猪皮肤溃疡中的密螺旋体
前言
众所周知,螺旋体能寄居在猪不同的皮肤伤口内。目前,螺旋体从肩部溃疡、耳朵坏疽、齿龈等部位分离并鉴定。本研究旨在进一步调查螺旋体在猪皮肤损伤中的发生率及多样性,以此来研究伤口外观、螺旋体寄居部位以及齿龈部螺旋体与皮肤溃疡螺旋体之间的关系。
材料与方法
2010年4月-2011年12月从瑞典19个猪群中的皮肤损伤处提取皮肤碎屑、棉拭子、活组织和齿龈部坏疽棉拭子检查。蓄群、动物情况、取样方式和实验室检测方法细节在文献中已描述。关于本实验所采用实验方法的概要如表1所示。另外,采用苏木精染色及HE染色进行组织病理学检查。Sanger测序法及高通量测序法(HTS)被用于部分样品分析(未发表)。
结果
在所有猪群的皮肤溃疡中都检出螺旋体。各种方法所检测到密螺旋体阳性样本都显示在表1中。通过Sanger法对ISR2基本测序的结果表明密螺旋体存在三种不同的基因型:一种未知型,T.pedis,T.parvum。T.pedis及T.parvum的分离株的基因型与螺旋体属OMZ840非常相似。分析发现,溃疡以及齿龈部分离株的ISR2基因型一致。组织病理学以及荧光原位杂交研究表明,多数被调查的伤口都是慢性自然伤口。密螺旋体多数定殖于坏死表面碎片和有活力的粗糙组织中。其它细菌主要定殖在溃疡表面。螺旋体属是溃疡中最主要的细菌。通过荧光原位杂交以及高通量测序等方法的深入研究结果表明,T.pedis在所检样本中占有主要地位。
分析与讨论
本研究表明,螺旋体属在猪耳朵坏死、肩部溃疡、面部溃疡及其它溃疡中出现频繁。在溃疡及齿龈部位分离的螺旋体的基因型数量高于其它报道。同样的基因型螺旋体能定殖于溃疡及齿龈中;另外,这两处分离到的螺旋体ISR2基因型的一致性表明,可能是由于从嘴到皮肤溃疡的传播导致。同时,我们也检测了我们不能培养或做种属鉴定的未知型细菌;采用免培养分析法对比二者之间存在明显不同,表明螺旋体较难分离。组织病理学分析发现肩部溃疡和耳朵坏死与前面描述的类似的损伤一致。采用荧光原位杂交、PCR检测ISR2、高通量测序的方法分析,发现所有被调查的所有损伤存在显著的一致性。螺旋体属作为耳朵坏死及肩部溃疡的病因仍需要研究,但本研究结果表明其在猪慢性或急性皮肤溃疡中扮演重要角色。
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