PCV2优先感染胎儿胸腺
中国养猪网讯: 前言
猪群中广泛存在PCV2感染,PCV2与几个损失大的疾病相联系统称为猪圆环病毒疾病(PCVD’s),如断奶多系统衰弱综合征(PMWS)。然而PCV2大多数是亚临床感染,它也是一个胎儿病原体,引起母猪妊娠后期流产和产死胎。但这些损失在野外条件来说似乎是罕见的。沈等和奇瑞等发现许多子宫内感染是亚临床型,在健康的未吃母乳的小猪血清中分别有39.9%和63%PCV2基因患病率。在PMWS中,胸腺萎缩是一种常见的病变,同样也存在胎儿有这种病变的记录。然而这些PCV2感染主要用存在高浓度PCV2抗原的免疫组化(IHC)或免疫荧光检测方法来进行评估。此外,胎儿中PCV2病变的其他组织比胸腺和其他细胞能吸引更多关注,这些细胞包括心肌细胞、淋巴结、脾脏、肝细胞和巨嗜细胞。
材料与方法
在瑞士普遍接种PCV2疫苗之前,采集了具有繁殖障碍母猪的胎儿样品,这些样品来自38个猪场的66头母猪的年龄超过55天的135个IHC-PCV2阴性胎儿(6个55-70天的胎儿、37个70-110天的胎儿、73个正常出生的胎儿、10个推迟分娩的胎儿)。用荧光原位杂交(FISH)来检查PCV2病毒DNA的存在。在解剖的病死猪中,从胸腺、脾、肠系膜淋巴结、扁桃体、心脏、肝脏和胎盘定期收集组织并处理(福尔马林固定和石蜡嵌入式),进行组织学的苏木精染色(HE)和特定PVC2单克隆抗体F217进行IHC(抗原免疫组化)和特定的寡核苷酸荧光原位杂交(FISH)方法。并用新的寡核苷酸P2O-O1r 5’GCA TGT TGCT GCT GAG GTG CTG CCG 3’引物扩展630个碱基大小。在器官的FISH信号解释为一半数量和从负极(-)到++++得分。用常规PCR检测45个随机挑选超过55天的胎儿组织,以及从额外的4个30天的胎儿无组织学上的可识别的胸腺用巢式PCR(第一条引物5’ GGA GGA TTA CTT CCT TGG TAT TTT GG 3’,第二条引物5’GGT GCT GCC GAG GTG CTG 3’)进行检测。
结果
在调查的胎儿器官中出现PCV2的CAP蛋白,没见到心肌和淋巴组织病变。用常规PCR检测55天以上的45个胎儿有43个胎儿阳性(96%),包括PCV2b型。用巢式PCR检测30天以上的4个胎儿均显示阳性,也是PCV2b基因型。
在FISH检测中胎儿几乎100%感染PCV2,存在最高的流行和感染最多的位置在胸腺,而其他器官的感染是大大减少(降序排列:肠系膜淋巴结、肝、脾、心和胎盘)。
结论和讨论
众所周知,现场调查100%的胎儿胸腺组织损失来自于母猪PCV2感染。PCV2的抗原并没有在这些胎儿中发现,因此损失不能归结于PCV2的感染。然而PCV2相关的损失及病毒大多存在心肌和心肌坏死纤维素炎症中,我们的小猪能分离到PCV2 DNA,甚至表明PCV2在心肌的DNA比其他器官要少。这些小猪也没有心肌组织学病变。
大多数实验感染和自然感染研究中,由于PCV2 cap蛋白的检出,意味着PCV2主要感染胎儿心肌细胞、第二排肝脏和二级淋巴器官。然而PCV2基因组在组织的亚临床感染似乎与其他病毒不同。
我们认为,PCV2的潜伏感染存在胎儿猪中。这种病毒可能早期垂直传入到胚胎。这和鸡传染性贫血病毒(CIAV)感染胸腺组织一样,也是唯一其他著名的环病毒科。
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