猪口服水稻疫苗诱发主动和被动免疫从而预防产肠毒素的大肠杆菌引起的痢疾
中国养猪网讯: 引言
产肠毒素的大肠杆菌(ETEC)能够引起新生仔猪和断奶猪的严重腹泻。尽管目前还没有单独感染ETEC引起高死亡率的报道,但不同病原的多重感染会加剧腹泻的症状。在日本,ETEC引起的仔猪腹泻发病率仅次于轮状病毒。因此,要求进行保健和免疫程序来降低ETEC对新生仔猪和断奶仔猪的感染。我们最近开发了一个基于大米的霍乱疫苗表达体CTB(MucoRice-CTB)。该疫苗的优势是能够长期保存(>1.5 y),且不需要冷链保存,输送该疫苗无需用到针头和注射器。霍乱毒素B亚单位(CTB)与ETEC热不稳定毒素(LT)的B亚单位的氨基酸的同源性为75%,该毒素是导致腹泻的主要原因。因此,我们选择MucoRice-CTB作为口服候选疫苗。
材料与方法
1 g MucoRice-CTB混合饲料饲喂2月龄的迷你猪或者是怀孕母猪,每两周饲喂4次。采集免疫过的迷你猪的血清和肠道清洗液,ELISA测定CTB/LTB的IgG或IgA。
衡量催乳的免疫力,采集怀孕到生产后2周的初乳和奶水。
中和反应产生抗LT的抗体通过肠循环试验来测定。ETEC菌株S7按CFU4x106或CFU4x108接种免疫过的迷你猪的回肠,16 h通过手术测定回肠内累积的液体。
结果
所有免疫的迷你猪都产生了CTB特异性黏膜IgA和体液IgG和IgA。CTB特定的IgG和IgA含量较高,分泌到初乳中,并且产生被动抗体能够转入到下一代的血清中。所有的抗体都与LTB有交叉反应。甚至, 迷你猪免疫后回肠中的水体积比对照组明显减少,表明MucoRice-CTB能够降低ETEC引起的腹泻。
结论与讨论
MucoRice-CTB,由水稻蛋白表达系统产生,通过口服方式免疫猪,诱导主动免疫和被动免疫预防ETEC。ETEC的LT在黏膜表面作用。因此,在小肠和母乳中毒素特异性分泌抗体IgA可能中和毒素。另外,MucoRice-CTB能够与饲料混合饲喂,在猪场和兽医临床能够很方便实施。
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