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鸡传染性支气管炎病原分析

2023-10-18 03:15:30 0

鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis of Chickens, IB)是有世界性分布的、由病毒引起的一种仅发生于鸡的急性、高度接触性的呼吸道疾病。各个鸡龄均易感,幼鸡以喘气为突出症状,在产蛋鸡出现蛋产量和品质下降。如果病原不是肾病变型毒株或不发生并发病,死亡率一般很低。该病病

  鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis of Chickens, IB)是有世界性分布的、由病毒引起的一种仅发生于鸡的急性、高度接触性的呼吸道疾病。各个鸡龄均易感,幼鸡以喘气为突出症状,在产蛋鸡出现蛋产量和品质下降。如果病原不是肾病变型毒株或不发生并发病,死亡率一般很低。该病病原的血清型较多,新的血清型不断出现,加上不适当的免疫程序,常导致免疫失败,致使该病不能得到**控制,给养鸡业造成巨大损失。

  鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis of Chickens, IB)是有世界性分布的、由病毒引起的一种仅发生于鸡的急性、高度接触性的呼吸道疾病。各个鸡龄均易感,幼鸡以喘气为突出症状,在产蛋鸡出现蛋产量和品质下降。如果病原不是肾病变型毒株或不发生并发病,死亡率一般很低。该病病原的血清型较多,新的血清型不断出现,加上不适当的免疫程序,常导致免疫失败,致使该病不能得到**控制,给养鸡业造成巨大损失。

  病 原

  鸡传染性支气管炎病毒(IBV)是冠状病毒科的代表种,为一种带囊膜单股RNA的病毒,其核酸呈螺旋对称性。电镜观察,病毒粒子略呈球形,直径 80~120nm,有囊膜,囊膜上有12~24nm长的、末端呈圆形的梨状纤突,纤突间的间隙较宽,形成规则排列,宛如皇冠状,故名冠状病毒。直接从鸡体分离的病毒,纤突较齐全,而在体外传代的毒株往往部分缺失。

  IBV核酸有27 000多碱基对长,为不分节RNA病毒中基因组最长者。李德山等(1991)对本病毒的结构蛋白进行分析后发现共有4种,其中分子量为90K的是纤突蛋白 (S),合成后分裂成的S1,84K为纤突蛋白分裂成的S2,51K为核衣壳蛋白(N),30K为整合在双层膜中的膜蛋白(M)。S1与中和抗体和血凝抑制(HI)抗体有关,S2与吸附有关。

  对各地分离的IBV野毒进行理化特性测定,各实验室使用的条件和得出的结论不尽相同。上海地区的沪1株于56℃,15~30min仍有感染致死鸡胚的活性;北京地区分离的G22株30min已基本灭活,而s株可耐受45min。据认为,耐热株作制苗用有价值。IBV毒种保存宜于低温进行,-20~- 30℃可存活7年,冻干置于3~4℃,19年仍存活。

  鸡胚是繁殖IBV最常用的实验室宿主系统。一般将病料接种9~11日龄鸡胚的尿囊腔作初次分离。**次接种往往不引起鸡胚死亡,但随着传代次数的增加,IBV对鸡胚的致病力也将增强。这表现为鸡胚死亡率增加,死亡时间提早,胚体发育受阻而出现蜷缩胚或侏儒胚。不管哪一代次早期死亡的胚体可见充血、出血,后期死亡或存活的胚体则无此变化。可在第二代出现死胚。出现蜷缩胚或侏儒胚的代次视分离株可发生在第2~7代,而达到80%蜷缩胚则代次要更多,有 7~22代不等。

  蜷曲胚:鸡胚的脚抱住头部,活动缓慢或不能自由活动;打开蛋壳后可见羊膜增厚,表面显得干燥、纤维化,并显得混浊不太透明,紧紧包裹着胚,羊水量也比正常胚少,甚至没有羊水,羽毛发育不良,故也称“僵化胚”。

  侏儒胚:外形似乎正常,但比同龄正常胚小1/3至1/2,接种后6天尤为**,鸡胚泄殖腔肿胀并常见内有白色脂肪样小滴的囊状物,肺部有浆液性渗出液,并比正常胚的肺小。肝呈紫色或边缘有杏黄色的胆性病变,有的甚至有局部坏死或整个肝变成绿色。再有一个**的特点是许多胚尿囊液清澈透明,其尿囊液的量也有所增加。

  应用鸡胚肾(CEK)细胞繁殖 病毒引起合胞体形成,合胞体最终脱落和死亡而使细胞单层出现空斑。未完全或完全脱落的合胞体,由于表面张力的关系呈球形,外缘整齐,内有占大部分的透明空泡。这种细胞病变在初次分离野毒时一般是见不到的,往往需要连续传代6次以上才出现。CEK原代细胞培养物除了有对IBV易感的类上皮型细胞外,其实还存在不易感的成纤维细胞。待后者逐步增多而占据原先的空斑,就可能出现后来细胞病变反而变少的现象。这是观察IBV感染的原代细胞培养物时要注意的。

  只有少数IBV株才可生长在非鸡源的Vero细胞上,用胰酶(6µg/m1)处理Vero细胞,可以使感染IBV的细胞培养物的细胞融合率****,如5%~100%。

  鸡气管上皮细胞对IBV易感性很高。细胞被感染后,其突入腔内的纤毛逐渐停止原来极迅速的摆动。刘福安(1983,1989)利用鸡胚气管器官培养物来确定在CEK细胞上育传IBV过程中是否仍存在病毒以及筛选IBV免疫原单克隆抗体。感染后的上皮细胞其纤毛运动于24h**减慢,72h则完全停止并伴有细胞脱落。此法虽然简单但要求制备气管环时预先剥净外面的脂肪和使用倒置显微镜观察。

  IBV不凝集鸡红细胞,能够干扰新城疫病毒B1株在鸡胚里的繁殖。这些特性可利用于提纯、鉴定新分离的IBV。

  IBV是一种较容易发生变异的病毒。可根据病毒-血清中和试验将毒株分类为若干血清型,也可视其致病程度分类为若干病理型。至少有14个血清型。马萨诸塞(M)型引起最严重的呼吸系症状,是我国的主要流行株,可与康涅狄格(Conn)型交叉免疫。荷兰(H)株对M、Conn、JMK、佛罗里达和 SE-17株可产生交叉免疫,故在我国是主要的疫苗毒株。IBV有4个病理型。Ⅰ型:不引起呼吸道症状,但引起喉和气管组织学病变。Ⅱ型:引起**呼吸道症状以及上呼吸道组织学病变。Ⅲ型:引起**呼吸道症状以及上呼吸道和支气管组织学病变。Ⅳ型:引起所有上述呼吸道症状与病变以及间质性肾炎。与M株具有相同抗原簇的毒株,属于Ⅲ型,其他与荷兰变异株有相同抗原簇的属于Ⅳ型。

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