猪群感染星状病毒（PAstV）的临床重要性调查
前言
许多星状病毒（AstV）与包括人类和猪在内的多种宿主肠道疾病有关（1）。我们已经确认了5种猪的AstV基因型（PAstV），然而，关于PAstV的重要性，包括其致病潜力仍然未知。近年来，一些AstV种属与肠外临床症状相关，有迹象表明，系统性AstV感染也发生在猪（2）。这项研究目的是调查美国猪粪便样品中PAstV核酸的阳性率，并定性其主要基因型。此外，建立PAstV血清学试验来进一步调查患病率。
材料和方法
从美国爱荷华州立大学兽医诊断实验室2011-2012年期间提交的常规诊断病例中随机选择509份粪便样本。大部分样品是来自具有腹泻症状的猪。这些样本来源于美国19个州的255个农场。建立了两种不同PAstV基因型特异性实时PCR检测方法，利用其检测所有样品（3）。选取PCR阳性标本进一步测序，通过GenBank将测序结果与其他AstV序列对比。此外，构建PAstV3和4基因型的感染性克隆并在体外测试。外源PAstV4的衣壳质粒表达，表达的蛋白质作为抗原包被ELISA板。
结果
在美国猪群体内已经发现五个已知PAstV基因型（表1）。经常观察到有两个或更多PAstV基因型同时感染一头猪。我们检测到PAstVRNA阳性样品具有63.9％的高患病率（325/509），其中PAstVRNA阳性猪感染PAstV4的比例为97.5％（317/325）。进一步的基因组测序和所选菌株的鉴定结果显示，已知PAstV株的低序列同源性（49.2％〜89％）表明存在PAstV2，PAstV4和PAstV5新亚型。第一个完整分离得到的PAstV3基因组与貂AstV和新型人类AstVs有50.5％至55.3％的同源性，而与其他PAstV基因型同源性为38.4％至42.7％。系统发育分析显示，PAstV1，PAstV2和PAstV3与人类和其它动物的AstVs而非自身的同源性更高，这为PAstVs在过去跨种属传播以及具有人畜共患的潜力提供了证据。构建PAstV感染性克隆并用于转染ST细胞，PK15细胞，和IPECJ2细胞。初步结果表明，在体外能成功感染（通过连续传代增加病毒在感染的细胞中RNA水平）。在猪接触PAstV4阳性粪便后血清学测定能够检测到PAstV4血清转化现象。
结论与讨论
关于PAstVs的患病率，临床意义和分子特征的信息仍然有限。在细胞上培养繁殖PAstVs难以成功，使得PAstVs的毒力与发病机制的研究进展有限。我们团队在研究PAstV感染性克隆用于实验性接种方面取得一定进展，并且我们将会提交新数据。在本研究中，我们发现在美国高患病率PAstV猪中PAstV4为主要基因型（3）。PAstV感染猪的临床意义目前还不清楚，是健康的猪可以隐性感染PAstV还是感染了其他肠道病原体如轮状病毒，冠状病毒和杯状病毒（4）才具有这些临床症状。如果未来研究发现PAstV是在全球猪群中广泛存在的，那么它能够诱发猪的病变和疾病。
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