猪鼻支原体和猪滑液囊支原体野毒株的两种Tailor
前言
猪滑液囊支原体（Mhs）和猪鼻炎支原体（Mhr）都能导致8-30周龄猪和断奶前仔猪的一系列关节疾病。在过去的三年里，从现场实例中分离得到的两种菌被送至MVP实验室，从而使Tailor-Made®疫苗产品在戏剧性地增加。在美国，由于市场上没有商品化的猪滑液囊支原体和猪鼻炎支原体疫苗，因此Tailor-Made®疫苗被频繁使用以预防大猪或小猪的关节疾病所造成的巨大经济损失。然而，在感染猪群中并不难分离到多样性的猪滑液囊支原体和猪鼻炎支原体菌株。为了设计一种多价疫苗，因此采用分子学方法进行分离、鉴定区域性菌株显得非常有必要。
材料与方法
100株猪滑液囊支原体和150株猪鼻支原体由MVP实验室分离得到，并采用PCR扩增法进行种属鉴定，微用型凝胶电泳进行可溶性蛋白质谱分析，用免疫印迹法对免疫猪血清进行支原体特异性抗原结构识别，用PCR检测Mhr的VLP（可变脂蛋白）基因，用PCR-RFLP法鉴定Mhs。
结果与讨论
在MVP实验室中，150株支原体菌株从患有多发性浆膜炎、多发性关节炎、肺炎或结膜炎的病猪中分离得到，并采用滑液囊支原体基因PCR扩增法进行鉴定。其中100株分离于老残猪的肺部、关节、肌腱和腿部肌肉，并通过猪鼻炎支原体基因PCR扩增鉴定。猪滑液囊支原体和猪鼻炎支原体蛋白多样性检测通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和凝胶染色进行，最终得到显示种间分歧的系统树图。猪滑液囊支原体脂蛋白系统的多样性决定了其表面变异的能力和逃避宿主免疫系统的能力。表1显示了这150株从不同组织中分离到的猪鼻炎支原体中最常见的vlp基因的分布。表2显示了从一个感染蓄群中分离到的5株猪滑液囊支原体的限制性片段长度多态性模式以及抗原结构。本研究结果表明猪滑液囊支原体和猪鼻炎支原体种间存在多样性。本研究为分子学方法的应用除了提供有效的猪支原体流行病学分析，同时还帮助兽医选择正确的Tailor-Made®菌株疫苗产品来控制年老或年轻猪的跛残问题。
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